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你是按這個(gè)程序操作AFT免疫親和柱的嗎?

更新時(shí)間:2021-01-07點(diǎn)擊次數(shù):1778
  AFT(aflatoxin)免疫親和柱產(chǎn)品概述:
  AFT(aflatoxin)是一類真菌(如黃曲霉和寄生曲霉)的有毒性的代謝產(chǎn)物,是一種毒性*的物質(zhì),具有很強(qiáng)的致癌性。AFT(aflatoxin)的危害性在于對人及動物肝臟組織的破壞作用,嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以AFT(aflatoxin)B1常見,其毒性和致癌性也是*的。在玉米、花生、小麥、棉花種子和一些干果中常能檢測到AFT(aflatoxin)B1。
 
  反應(yīng)原理:
  AFT(aflatoxin)B1免疫層析親和柱測定的原理是抗原抗體反應(yīng)。AFT(aflatoxin)B1單克隆抗體固定于柱內(nèi)凝膠上,樣品中的AFT(aflatoxin)B1經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后緩慢通過AFT(aflatoxin)B1免疫親和柱,在柱內(nèi)AFT(aflatoxin)B1與抗體特異性結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱,除去未結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫AFT(aflatoxin)B1,注入到分析儀器中進(jìn)行檢測。

  AFT(aflatoxin)免疫親和柱的操作程序:
  1、連接:將免疫親和柱后蓋取下,用剪刀剪開,重新蓋上,連接于泵流操作架的30mL注射器下;
  2、上樣:移取上述提取液移至注射器內(nèi),打開下端堵頭;
  3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱,建議重力過柱;
  4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗,棄去全部流出液,并使2-3mL空氣通過柱體;
  5、洗脫:為保證洗脫充分,以2.0mL色譜級甲醇進(jìn)行洗脫,重力洗脫即可。先,將免疫親和柱內(nèi)液體排干,加1.0mL甲醇于柱管內(nèi),重力過柱,當(dāng)溶劑通過柱子后;再加入1.0mL甲醇重復(fù)上述洗脫步驟,后輕微加壓排凈洗脫液,合并洗脫液,將洗脫液濃縮吹干,用1mL流動相復(fù)溶,渦旋30s溶解殘余物,0.22μm濾膜過濾,待測。
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